双向凝胶电泳仪是基于蛋白质电点不同用等电聚焦分离的,双向凝胶电泳仪和凝胶成像仪同样运用比较多,那么,双向凝胶电泳仪和凝胶成像仪有什么区别?
双向凝胶电泳仪第一向基于蛋白质的等电点不同用等电聚焦分离,第二向则按分子量的不同用SDS-PAGE分离,把复杂蛋白混合物中的蛋白质在二维平面上分开。根据蛋白质的等电点和分子量大小,分别在凝胶介质二维空间上对蛋白质分子进行等电点聚焦和电泳来分离与纯化蛋白质。
双向电泳就是等电聚焦电泳和SDS-PAGE的组合。
1、 先进行等电聚焦电泳(按照蛋白等电点pI分离):在胶中加入双性电解质溶液,加上电场后建立稳定PH梯度,蛋白质溶液加入后建立电场,蛋白以不同PI分离开来。
2、然后再进行SDS-PAGE(按照分子大小):将上一步的胶加上横向电场,同一PI中聚集的蛋白,由于分子量不同而分开。
3、经染色(一般是银染)得到的电泳图是个二维分布的蛋白质图。
二维电泳使用于蛋白组学研究,对大批量蛋白筛选鉴定中存在很大优势,通过不同胶做对比,把不同处的胶割出来单独鉴定。
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